培养基灭菌是否彻底,影响因素很多,除了培养基内杂菌的种类和数量,灭菌温度的高低,时间长短外,还取决于:
1. 营养成分的保持 湿热灭菌时,微生物被杀死的同时,培养基的营养成分也遭到了一定的破坏,特别是氨基酸和维生素。如在121℃,仅20min,就有59%的赖氨酸和精氨酸及其他碱性氨基酸被破坏,蛋氨酸和色氨酸也有相当数量被破坏。在热的作用下某些营养成分还可能因受热而相互之间发生反应,造成培养基中原有营养成分的数量变化,因而影响培养基质量。 2. 微生物的耐热性 细菌芽孢的热阻较大,灭菌所需要的时间取决于把细菌芽孢减少到所规定数目的时间。 3. pH值 pH值对微生物的耐热性影响很大。pH值介于6.0~8.0时,微生物最不易死亡。pH<6.0时,微生物比较容易死亡,此时H+很容易渗入微生物的细胞,从而改变细胞的生理反应,促使其死亡。所以培养基的pH越低,所需的时间也越短。 4. 培养基成分 油脂、糖类及蛋白质等组成的高浓度有机物会包于细胞的周围形式一层薄膜、影响热的传导。而高浓度的盐类、色素则削弱其耐热性,灭菌较易。例如:大肠杆菌在水中加热至60-65℃便死亡,在10%糖液中需70℃加热4-6分钟才死亡,在30%糖液中需30分钟才死亡。一般糖类含量较多的时候最好选用115℃,30分钟;一般的培养基可选择121℃20分钟。 5. 泡沫 泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死其中的杂菌。 6. 颗粒 颗粒小,容易灭菌,颗粒大,则难灭菌。对于含有少量较大颗粒及粗纤维的培养基,可用粗滤的方法(不应影响培养基质量)予以除去,培养基结块会造成培养基灭菌的不彻底。 7. 灭菌锅内空气是否排净 这个是影响灭菌是温度和压力比例关系的要点,同样达到了相同的压力的情况下,如果空气未能排净,也就是说不是纯蒸汽灭菌,此时的温度不一定能达到目的要求,会严重影响灭菌效果。 8. 换热器在培养基灭菌中的应用 除菌原理是利用微生物不能透过过滤膜除菌。在工业生产中,对于培养基、管道、设备的灭菌,通常采用蒸汽加热到一定的湿度,并保湿一段时间的灭菌方法,称之为湿热灭菌。湿热灭菌的显著优点是:使用方便、无污染,而且其冷凝水可以直接冷凝在培养基中,也可以通过管道排查。 (1)螺旋板换热器在培养基连续灭菌工艺中的应用 (2)发酵培养基连续灭菌及冷却控制系统——板式换热器灭菌工艺控制系统 (3)培养基灭菌装置——换热机组的应用 如下图所示: 广州力和海得换热设备有限公司(LEAHOHEAT)是落户于广州市白云区民营科技园是高新企业,是国内集研发、生产、销售、服务于一体的大型热交换设备、热工设备及换热系统专业厂商,积累了丰富的产品设计、技术、制造和运行验。 我司生产产品有:板式换热器、卫生级板式换热器、气气板式换热器、空气热交换器、管壳式换热器、容积式换热器、螺旋板式换热器、智能换热机组等,欢迎广大客户订购。